Practica 7: Identificación de Pigmentos Vegetales por Cromatografía en capa fina y en columna


PRECUESTIONARIO:
1.- ¿Cuáles con los pigmentos vegetales?
 
 
2.- ¿Qué función tiene los pigmentos vegetales?
 
 
 
 
INTRODUCCION:
La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia y la física. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.
Las técnicas cromatografías son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase móvil que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico) que arrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido. Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria. De este modo, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Después de que los componentes hayan pasado por la fase estacionaria, separándose, pasan por un detector que genera una señal que puede depender de la concentración y del tipo de compuesto.
Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla
Los colores que presentan los vegetales son debidos a unos compuestos químicos llamados pigmentos. El color que presenta un determinado órgano vegetal depende generalmente del predominio de uno u otro pigmento o la combinación de ellos. Además, algunos de los pigmentos que condicionan el color están estrechamente ligados a las actividades fisiológicas del propio vegetal.
El color verde en los vegetales es debido a la presencia de dos pigmentos estrechamente emparentados llamados clorofila a y clorofila b . Se encuentran prácticamente en todas las plantas con semilla, helechos, musgos y algas. También aunque aparentemente falten en algunas hojas de color rojo o amarillo, cuando se extraen las otras sustancias colorantes de estas, puede comprobarse incluso allí la presencia de las clorofilas, que estaban enmascaradas por los demás pigmentos. Asociados con las clorofilas, existen también en los cloroplastos dos clases de pigmentos amarillos y amarillo-anaranjados que son los xantofilas y carotenos.

OBJETIVO:
•Separar e identificar los pigmentos fotosíntesis de las plantas, utilizando la cromatografía en papel y en capa fina.


MATERIALES:
• Tubos de ensaye
• Papel filtro
• Gis Blanco
• 1 hoja de Espinaca o Acelga
• Alcohol etílico (96%)
• Bencina


PROCEDIMIENTO:
Escucha con atención las instrucciones del catedrático.
Extracto vegetal

• Coloca una hoja de acelga en el mortero y agrega un poco de bencina
• Masera por completo la hoja con el pistilo del mortero

Cromatografía en papel de pigmentos vegetales.

• Recorta una tira de papel de 1 cm de ancho por 10 cm de largo
• Coloca un Gota del extracto a 1 cm de la parte inferior de la tira de papel
• agrega un poco de alcohol a el tubo de ensaye y coloca la tira de papel en el tubo de ensaye con la gota de extracto hasta abajo.
• deja que el alcohol suba por el papel hasta que logres distinguir las tiras de los pigmentos separados.

Cromatografía en Columna de tinta negra

• En el gis blanco, has una línea a el rededor de la parte inferior a 1 cm.
• Coloca el gis en un frasco y agrega alcohol hasta que toque la parte inferior de la línea pintada
• deja que se separen las lineas de colores que compone el color negro del marcador.

Cromatografía en papel de tintas de colores

• Recorta una tira de papel de 1 cm de ancho por 10 cm de largo
• Dibuja una linea en la parte inferior a 1 cm.
• coloca la tira en el frasco y agrega alcohol hasta que toque la parte inferior de la línea pintada
• deja que se separen las lineas de colores que compone el color del marcador.

• Realiza los dibujos o esquemas correspondientes uno de cada cromatografia a color.

• Y describe en cada uno de ellos los resultados obtenidos.

• Pega en el reporte el cromatograma del papel obtenido.

Separación de Pigmentos vegetales
 
Cromatografía en papel de pigmentos vegetales


CUESTIONARIO:
1. ¿ De que color son las bandas formadas en el papel filtro?
2. ¿ A que pigmentos corresponden?
3. ¿ Que sustancia se utiliza para la extracción de los pigmentos?
4. ¿ Que es un cromatograma?
5. ¿ Que pigmentos se observan en el extremo inferior del papel filtro?